|
تهیه و ارزیابی بارگذاری پروتئین ریواکس در نانوذرات کایتوزان
|
داود صادقی    ، فیروز ابراهیمی* ، مهدی زین الدینی ، یوسف تاروردی زاده ، مصطفی بخشی ، محمد جواد باقری پور ، سیدمجتبی آقایی |
| 1- مرکز تحقیقات زیست شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه امام حسین (ع)، تهران، ایران ، febrhimi@ihu.ac.ir |
|
|
چکیده: (3899 مشاهده) |
سابقه و هدف: سم ریسین یک گلیکوپروتئین هترودایمر میباشد که با توجه به سمیت بالا از آن بعنوان یک عامل بیوتروریسمی استفاده میشود. درحال حاضر مطالعات ایمنیزایی علیه ریسین بر روی دو کاندید واکسن زیر واحدی شامل ریواکس و RVEc متمرکز شده است. این مطالعات، ایمنیزایی کاندید واکسن را به صورت تنها و همراه با ادجوانت مورد بررسی قرار دادهاند ولی تاکنون از سیستمهای تحویل نوین مانند نانوذرات، برای بهبود ایمنیزایی آنها استفاده نشده است. هدف از این تحقیق،تهیه و ارزیابی بارگذاری کاندید واکسن نوترکیب ریواکس در نانوذرات کیتوزان می باشد.
مواد و روشها: در این مطالعه تجربی، پس از انتقال ژن ریواکس به باکتری، القاء بیان و تخلیص پروتئین ریواکس توسط ستون کروماتوگرافی میل ترکیبی، پروتئین ریواکس در نانوذرات کایتوزان با روش ژلاسیونیونی بارگذاری شد. سپس خصوصیات نانوذرات شامل اندازه، مورفولوژی، درصد احتباس و الگوی رهایش پروتئین ریواکس از نانوذرات و پایداری این پروتئین در طی شرایط اسیدی بارگذاری در نانوذرات توسط SDS-PAGE مورد ارزیابی قرار گرفت. همچنین بررسی ایمنیزایی بر روی 3 گروه 4تایی موش توسط پروتئین ریواکس، نانوذرات حاوی پروتئین و بافرفسفات صورت پذیرفت.
یافته ها: نتایج این تحقیق نشان داد که نانوذرات حاوی پروتئین دارای اندازه 178نانومتر، پتانسیل زتای27/8+ میلیولت و شاخص پراکندگی برابر 0/193 میباشند. همچنین برطبق نتایج SDS-PAGE مشخص شد که پروتئین ریواکس در طی فرآیند تهیه نانوذرات کایتوزان تخریب میشود. بالاترین تیتر آنتیبادی مربوط به گروه دریافت کننده پروتئین به تنهایی بود (0/082 ± 2/606) که با گروه دریافت‌کننده نانوذرات حاوی پروتئین (0/005 ± 0/367) و گروه شاهد تفاوت معنی داری داشت (0/01p<). همچنین از لحاظ آماری تفاوت معنیداری بین نمونههای شاهد و نانوذرات بارگذاری شده مشاهده نشد.
نتیجه گیری: نتایج این تحقیق نشان داد که پروتئین ریواکس در شرایط اسیدی تولید نانوذرات کایتوزان، ناپایدار بوده و روش ژلاسیونیونی برای بارگذاری ریواکس در نانوذرات کایتوزان مناسب نمیباشد. |
|
| واژه‌های کلیدی: کایتوزان، نانوذرات، ریواکس، واکسن |
|
|
متن کامل [PDF 363 kb]
(1289 دریافت)
|
نوع مطالعه: تجربی |
موضوع مقاله:
نانوبیوتکنولوژی(ریز زیست فناوری)
دریافت: 1396/10/4 | پذیرش: 1397/4/20 | انتشار: 1397/5/1
|
|
|
|
|
|
|
| ارسال پیام به نویسنده مسئول |
|
|
