Journal of Babol University of Medical Sciences
مجله علمی دانشگاه علوم پزشکی بابل
J Babol Univ Med Sci
Medical Sciences
http://jbums.org
1
admin
1561-4107
2251-7170
10.22088/jbums
fa
jalali
1393
9
1
gregorian
2014
12
1
16
12
online
1
fulltext
fa
جداسازی و تمایز سلولهای بنیادی پالپ دندان به سمت ادونتوبلاست
Isolation and Differentiation of Dental Pulp Stem Cells into Odontoblastic Lineage
دندانپزشکی(اندو)
Dentistry (Endo)
تجربی
Experimental
<div style="text-align: right"><p class="MsoNormalCxSpFirst" dir="rtl"><b><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra' color: blue">سابقه و هدف:</span></b><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra'"> با توجه به منابع
محدود سلول های بنیادی یافتن راهکارهای مناسب برای جداسازی و تکثیر و تمایز این
سلول ها حائز اهمیت می باشد. یکی از منابع سهل الوصول سلول های بنیادی بالغ، پالپ
دندان مولر سوم انسان می</span><span lang="FA"></span><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra'">باشد که معمولا بدون استفاده می ماند. این سلول ها
قابلیت تمایز به انواع سلول ها را دارند. هدف از این پژوهش جداسازی سلول های
بنیادی از پالپ دندان مولر سوم انسان با روشی نوین، کشت این سلول ها و سپس القاء
تمایز سلول های کشت داده شده به سمت ادونتوبلاست بود.<o:p /></span></p><p class="MsoNormalCxSpMiddle" dir="rtl"><b><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra' color: blue">مواد و روشها:</span></b><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra' color: blue"> </span><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra'">در این مطالعه
تجربی تعداد 20 عدد دندان نهفته عقل جهت استخراج سلولهای بنیادی مورد استفاده
قرار گرفت. از روش کشت قطعات بافت پالپ هضم شده برای جدا سازی سلول های بنیادی
استفاده شد. بیان برخی ژن های مارکر سلول بنیادی با روش </span><span dir="ltr">RT-PCR</span><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra'"><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span> در
این سلول ها بررسی شد. سپس این سلولها با استفاده از دگزامتازون و پروتئین شکل
زای استخوان (</span><span dir="ltr">BMP-2</span><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra'"><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span>) تحت القاء برای تمایز ادونتوبلاستی قرار گرفتند و بیان ژنهای
مارکر ادونتوبلاست در سلولهای تحت القاء با روشهای </span><span dir="ltr">RT-PCR</span><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra'"><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span> و
ایمیونوسیتوشیمی بررسی شد.<o:p /></span></p><p class="MsoNormal" dir="rtl"><b><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra' color: blue">یافتهها:</span></b><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra'"> سلولهای بنیادی با
بازدهی بالا از پالپ دندان جداسازی شدند و بررسی </span><span dir="ltr">RT-PCR</span><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra'"><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span> نشان
داد این سلولها برخی مارکرهای سلول بنیادی رویانی را بیان میکنند. سلولهای تحت
القاء، مارکرهای ادونتوبلاستی مثل </span><span dir="ltr">DSPP</span><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra'"><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span>، </span><span dir="ltr">DMP-1</span><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra'"><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span>، </span><span dir="ltr">BMP<sub>7</sub></span><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra'"><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span> و </span><span dir="ltr">Osteopontin</span><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra'"><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span> را بیان نکردند. همچنین پروتئین های </span><span dir="ltr">DSPP</span><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra'"><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span> و </span><span dir="ltr">DMP-1</span><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra'"><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span> در
سلولهای تحت القاء تولید نشدند.<o:p /></span></p><p class="MsoNormalCxSpFirst" dir="rtl">
<b><span lang="FA" dir="rtl" style="font-size: 10pt font-family: '2 Mitra' color: blue">نتیجه گیری:</span></b><span lang="FA" dir="rtl" style="font-size: 10pt font-family: '2 Mitra'"> علی رغم جداسازی موفقیت آمیز سلول های
بنیادی، با روش بهکار رفته، سلولهای القاء شده به سمت ادونتوبلاست تمایز نیافتند
که این امر می تواند به خاطر روش تمایز، پاساژ دادن حین القاء و یا کشت تک لایه
باشد.</span></p></div>
<p class="MsoNormal" style="direction: ltr unicode-bidi: embed"><b><span style="color: blue">BACKGROUND AND OBJECTIVE:</span></b> Limited resources for adult
stem cells necessitate appropriate methods for isolation, proliferation and
differentiation of these cells. Human third molar is an easily available source
in this regard that usually remains unused<span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span><span lang="FA" dir="rtl"><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span>.</span><span dir="ltr"></span><span dir="ltr"></span><span dir="ltr"></span><span dir="ltr"></span>
The aim of this study was to investigate the isolation, culture and odontogenic
differentiation of human dental pulp stem cells.<span style="font-size: 12pt"><o:p /></span></p><p class="MsoNormal" style="direction: ltr unicode-bidi: embed"><b><span style="color: blue">METHODS:</span></b> In this experimental study, twenty human third molars were
used for stem cell isolation. The digested pulp tissue culture approach was
used to isolate stem cells. Some markers of stem cells were studied by RT-PCR.
Stem cells were then induced towards odontoblast cells by use of BMP-2 and
Dexamethasone. Expression of odontoblastic markers was investigated in induced
cells by RT-PCR and immunocytochemistry methods.<o:p /></p><p class="MsoNormal" style="direction: ltr unicode-bidi: embed"><b><span style="color: blue">FINDINGS:</span></b> The human dental pulp stem cells were
isolated with high efficiency. RT-PCR
analysis showed that these cells express some markers of embryonic stem cells.
However, the induced cells did not expressed odontoblastic markers such as
DSPP, DMP-1, BMP7<span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span> </span>and<span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span> </span>Osteopontin.
Also the induced cells did not produce DSPP and DMP-1 proteins.<b><span lang="FA" dir="rtl" style="font-size: 12pt"><o:p /></span></b></p><p class="MsoNormal" style="direction: ltr unicode-bidi: embed"><b><span style="color: blue">CONCLUSION:</span></b> Despite the successful isolation of stem cells, the induced
cells failed to differentiate into odontoblasts. This may be due to the
differentiation method as well as the passage during induction or monolayer
culture<span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span><span lang="FA" dir="rtl"><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span>.</span><span dir="ltr"></span><span dir="ltr"></span><span lang="FA"><span dir="ltr"></span><span dir="ltr"></span> </span><o:p /></p><p class="MsoNormal" style="unicode-bidi: embed"><br></p>
واژه های کلیدی: سلول های بنیادی پالپ دندان, ادونتوبلاست, پروتئین شکل زای استخوان (BMP-2), دگزامتازون.
KEY WORDS: Dental Pulp Stem Cells,Odontoblasts, BMP-2,Dexamethasone.
23
31
http://jbums.org/browse.php?a_code=A-10-1472-1&slc_lang=fa&sid=1
Maryam
Raoof
مریم
رئوف
maryam.raoof@gmail.com
10031947532846007630
10031947532846007630
Yes
Department of Endodontics, School of Dentistry, Kerman University of Medical Sciences, Kerman, Iran.
گروه اندودنتیکس، دانشکده دندانپزشکی ، دانشگاه علوم پژشکی کرمان، کرمان، ایران
ali
Mohammadi Kamal-abadi
علی
محمدی کمال آبادی
ali.muhammadi@gmail.com
10031947532846007631
10031947532846007631
No
Department of Biotechnology, Institute of Science and High Technology and Environmental Sciences, Graduate University of Advanced Technology, Kerman,Iran.
گروه بیوتکنولوژی ، پژوهشگاه علوم و تکنولوژی پیشرفته و علوم محیطی ، دانشگاه تحصیلات تکمیلی تکنولوژی پیشرفته، کرمان، ایران
Mohammad Mehdi
Yaghoobi
محمد مهدی
یعقوبی
mehdi.yaghoobi@gmail.com
10031947532846007632
10031947532846007632
No
Department of Biotechnology, Institute of Science and High Technology and Environmental Sciences, Graduate University of Advanced Technology, Kerman,Iran.
گروه بیوتکنولوژی ، پژوهشگاه علوم و تکنولوژی پیشرفته و علوم محیطی ، دانشگاه تحصیلات تکمیلی تکنولوژی پیشرفته، کرمان، ایران
razieh
kooshki
راضیه
کوشکی
kooshki.razieh@gmail.com
10031947532846007633
10031947532846007633
No
Department of Biology, Faculty of Sciences, Shahid Bahonar University of Kerman, Kerman, Iran.
گروه زیست شناسی ،دانشکده علوم پایه ، دانشگاه شهید باهنر کرمان، کرمان، ایران
Mehdi
Abbasnejad
مهدی
عباس نژاد
mabbas@mail.uk.ac.ir
10031947532846007634
10031947532846007634
No
Department of Biology, Faculty of Sciences, Shahid Bahonar University of Kerman, Kerman, Iran.
گروه زیست شناسی ،دانشکده علوم پایه ، دانشگاه شهید باهنر کرمان، کرمان، ایران
ali
Derakhshani
علی
درخشانی
derakhshan_a64@yahoo.com
10031947532846007635
10031947532846007635
No
Department of Pathology, Stem Cell Research Center, Kerman University of Medical Sciences, Kerman, Iran.
گروه پاتولوژی، مرکز تحقیقات سلولهای بنیادی، دانشگاه علوم پزشکی کرمان، کرمان، ایران