1- مرکز ﺗﺤﻘﯿﻘﺎت ژنتیک ایمنی، داﻧﺸﮕﺎه ﻋﻠﻮم ﭘﺰﺷﮑﯽ ﻣﺎزﻧﺪران، ساری، ایران ، bojnordi@modares.ac.ir
چکیده: (3159 مشاهده)
سابقهو هدف: ﺗﻜﺜﻴﺮ آزﻣﺎﻳـﺸﮕﺎهی ﺳــﻠﻮل ﻫــﺎی ﺑﻨﻴــﺎدی اﺳــﭙﺮﻣﺎﺗﻮﮔﻮنیا یکی از گزینه های درمانی مردان نابارور است. ایجاد یک ریز محیط مناسب که شبیه به شرایط طیبعی ﺗﻜﺜﻴﺮ این ﺳــﻠﻮل ﻫــﺎ باشد، منجر به ارتقاء فرآیند کشت و اﺳـﭙﺮﻣﺎﺗﻮژﻧﺰ می شود. لذا هدف از مطالعه حاضر استفاده از داربست سه بعدی نانو رشته سیلک و هم کشتی با سلول های سرتولی به منظور افزایش تکثیر سلول های بنیادی اسپرماتوگونیا می باشد. مواد و روش ها: در این مطالعه تجربی سلول های بنیادی اسپرماتوگونیا با استفاده از هضم مکانیکی و آنزیمی دو مرحله ای از بیضه 50 موش 4-2 روزه (هر بار 5 عدد) جدا و به مدت دو هفته داده شدند. پس از قرارگیری 104×2 سلول در سطح داربست سیلک در شرایط محیط کشت قرار گرفتند. میزان زنده ماندن این سلول ها، با استفاده از تست MTT و اتصال آنها توسط میکروسکوپ SEM بررسی شد. متغیرهای مورد بررسی شامل ژن های اختصاصیStra8 ، DAZL و Piwill2 توسطReal time PCR و ایمونوسیتوشیمی بررسی شدند. یافته ها: قدرت زنده مانی سلول های کشت شده در حضور داربست و سرتولی (6±91)، (2±90) در مقایسه با گروه کنترل (2±85)، (8±83) در سطح بالاتری قرار داشت. نتایج Real time PCR موید افزایش معنی دار بیان مارکرهای اختصاصی سلول های بنیادی اسپرماتوگونی نظیر Stra8،Piwill2 و DAZL در سلول های کشت شده روی داربست (6±1/47) (5±1/28) (2±1/43) نسبت به گروه کشت دو بعدی (5±1/17) (3±1/05) (7±1/13) بود (0/05>p). نتیجه گیری:نتایج مطالعه نشان داد که داربست سیلک در حضور همکشتی با سلول های سرتولی می تواند سبب افزایش تکثیر آزمایشگاهی سلول های بنیادی اسپرماتوگونی شده و تاثیر مثبتی در بقا و تکثیراین سلول ها دارد.
