fa تاثیر داربست سیلک و هم کشتی با سلول های سرتولی بر تکثیر سلول های بنیادی اسپرماتوگونی علوم تشریح Descriptive Sciences تجربی Experimental <div style="text-align: justify;"><span style="font-family:Times New Roman;"><strong><span style="color:blue;">سابقه</span></strong> <strong><span style="color:blue;">و هدف: </span></strong><span style="color:windowtext;">ﺗﻜﺜﻴﺮ آزﻣﺎﻳـﺸﮕﺎهی ﺳــﻠﻮل ﻫــﺎی ﺑﻨﻴــﺎدی اﺳــﭙﺮﻣﺎﺗﻮﮔﻮنیا یکی از گزینه های درمانی مردان نابارور است. ایجاد یک ریز محیط مناسب که شبیه به شرایط طیبعی ﺗﻜﺜﻴﺮ این ﺳــﻠﻮل ﻫــﺎ باشد، منجر به ارتقاء فرآیند کشت و اﺳـﭙﺮﻣﺎﺗﻮژﻧﺰ می شود. لذا هدف از مطالعه حاضر استفاده از داربست سه بعدی نانو رشته سیلک و هم کشتی با سلول های سرتولی به منظور افزایش تکثیر سلول های بنیادی اسپرماتوگونیا می باشد</span><span style="color:black;">.</span> <span style="font-family:2 Mitra;"></span><br> <strong><span style="color:blue;">مواد و روش &shy;ها:</span></strong> در این مطالعه تجربی سلول های بنیادی اسپرماتوگونیا با استفاده از هضم مکانیکی و آنزیمی دو مرحله ای از بیضه 50 موش 4-2 روزه (هر بار 5 عدد) جدا و به مدت دو هفته داده شدند. پس از قرارگیری 10⁴&times;2 سلول در سطح داربست سیلک در شرایط محیط کشت قرار گرفتند. میزان زنده ماندن این سلول ها، با استفاده از تست <span dir="LTR">MTT</span> و اتصال آنها توسط میکروسکوپ <span dir="LTR">SEM</span> بررسی شد. متغیرهای مورد بررسی شامل ژن های اختصاصی<span dir="LTR">Stra8 </span>، <span dir="LTR">DAZL</span> و <span dir="LTR">Piwill2</span> توسط<span dir="LTR">Real time PCR </span>&nbsp;و ایمونوسیتوشیمی بررسی شدند.<br> <strong><span style="color:blue;">یافته&shy; ها:</span></strong> قدرت زنده مانی سلول های کشت شده در حضور داربست و سرتولی (6<span dir="LTR">&plusmn;</span>91)، (2<span dir="LTR">&plusmn;</span>90) در مقایسه با گروه کنترل (2<span dir="LTR">&plusmn;</span>85)، (8<span dir="LTR">&plusmn;</span>83) در سطح بالاتری قرار داشت. نتایج <span dir="LTR">Real time PCR</span> موید افزایش معنی دار بیان مارکرهای اختصاصی سلول های بنیادی اسپرماتوگونی نظیر <span dir="LTR">Stra8</span>،<span dir="LTR">Piwill2 </span>&nbsp;و<span dir="LTR"> DAZL </span>در سلول های کشت شده روی داربست (6<span dir="LTR">&plusmn;</span>1/47) (5<span dir="LTR">&plusmn;</span>1/28) (2<span dir="LTR">&plusmn;</span>1/43) نسبت به گروه کشت دو بعدی (5<span dir="LTR">&plusmn;</span>1/17) (3<span dir="LTR">&plusmn;</span>1/05) (7<span dir="LTR">&plusmn;</span>1/13) بود (0/05><span dir="LTR">p</span>).<br> <strong><span dir="RTL"><span style="color:blue;"><span style="font-size:10.0pt;">نتیجه گیری:</span></span></span></strong> <span dir="RTL"><span style="font-size:10.0pt;">نتایج مطالعه نشان داد که داربست سیلک در حضور همکشتی با سلول های سرتولی می تواند </span></span><span dir="RTL"><span style="font-size:10.0pt;">سبب افزایش تکثیر آزمایشگاهی سلول های بنیادی اسپرماتوگونی شده و تاثیر مثبتی در بقا و تکثیراین سلول ها دارد</span></span><span dir="RTL"><span style="font-size:10.0pt;">.</span></span></span></div> <div style="text-align: justify;"><span style="font-family:Times New Roman;"><strong>BACKGROUND AND OBJECTIVE:</strong> In vitro proliferation and maintenance of spermatogonial stem cells is one of the treatment options for infertile men. Creating a suitable microenvironment similar to the natural conditions of reproduction of these cells leads to the improvement of culture and spermatogenesis. Therefore, the aim of the present study was to use a 3D silk nanofibrous electrospun scaffold and co-culture with Sertoli cells in order to increase the proliferation of spermatogonial stem cells.<br> <strong>METHODS: </strong>In this experimental study, spermatogonial stem cells were isolated from the testes of 50 2-4-day-old mice (5 samples each time) using two-step mechanical and enzymatic digestion within two weeks. After placing 2&times;10⁴ cells on the surface of the silk scaffold, they were exposed to culture medium. The viability of these cells was assessed using MTT assay and their binding was evaluated by SEM microscopy. The studied variables, including Stra8, DAZL and Piwill2 specific genes were analyzed by real time PCR and immunocytochemistry.<br> <strong>FINDINGS:</strong> The viability of cultured cells in the presence of scaffold and Sertoli (91&plusmn;6), (90&plusmn;2) was higher than the control group (85&plusmn;2), (83&plusmn;8). Real time PCR results confirmed a significant increase in the expression of specific markers of spermatogonial stem cells such as Stra8, Piwill2 and DAZL in cells cultured respectively on scaffold (1.47&plusmn;6) (1.28&plusmn;5) (1.43&plusmn;2) compared to the 2D culture group (1.17&plusmn;5) (1.05&plusmn;3) (1.13&plusmn;7) (p<0.05).<br> <strong>CONCLUSION:</strong> The results showed that silk scaffold in the presence of Sertoli cell co-culture can increase in vitro proliferation of spermatogonial stem cells and can have a positive effect on the viability and proliferation of these cells.</span></div> داربست, سیلک, سرتولی, تکثیر, اسپرماتوگونی. Scaffold, Silk, Sertoli, Proliferation, Spermatogonia. 208 214 http://jbums.org/browse.php?a_code=A-10-3338-3&slc_lang=fa&sid=1 Z Narimanpour زینب نریمان پور zeinab.narimanpour@gmail.com 100319475328460048977 100319475328460048977 No 1. Immunogenetics Research Center, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, I.R.Iran 1- مرکز ﺗﺤﻘﯿﻘﺎت ژنتیک ایمنی، داﻧﺸﮕﺎه ﻋﻠﻮم ﭘﺰﺷﮑﯽ ﻣﺎزﻧﺪران، ساری، ایران M Nazm Bojnordi مریم نظم بجنوردی bojnordi@modares.ac.ir 100319475328460048978 100319475328460048978 Yes 1. Immunogenetics Research Center, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, I.R.Iran 1- مرکز ﺗﺤﻘﯿﻘﺎت ژنتیک ایمنی، داﻧﺸﮕﺎه ﻋﻠﻮم ﭘﺰﺷﮑﯽ ﻣﺎزﻧﺪران، ساری، ایران H Ghasemi هاتف قاسمی hatefdr@gmail.com 100319475328460048979 100319475328460048979 No 1. Immunogenetics Research Center, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, I.R.Iran 1- مرکز ﺗﺤﻘﯿﻘﺎت ژنتیک ایمنی، داﻧﺸﮕﺎه ﻋﻠﻮم ﭘﺰﺷﮑﯽ ﻣﺎزﻧﺪران، ساری، ایران