fa تولید پروتئین نوترکیب سیالیداز-کمپ و تهیه نانوذرات کایتوزان حامل آن به منظور استفاده بعنوان کاندیدای واکسن پروپیونی باکتریوم آکنه نانوبیوتکنولوژی(ریز زیست فناوری) Nanobiotechnology تجربی Experimental <div style="text-align: justify;"><span style="font-size:14px;"><span style="font-family:times new roman;"><strong><span style="color:blue;">سابقه و هدف:</span></strong> آکنه ولگاریس یکی از شایع&shy;ترین بیماری&shy;های پوستی است که فشار روحی زیاد و هزینه بالایی برای بیماران دارد. درمان&shy;های موجود کارایی پایینی داشته و شامل آنتی بیوتیک ها و داروهای ضدالتهابی هستند که با توجه به ماهیت مزمن بیماری بویژه در سنین جوانی، عوارض زیادی از&nbsp; جمله مقاومت آنتی&shy;بیوتیکی و واکنش&shy;های آلرژیک دارند. به همین دلیل یکی از رویکردهای جدید درمانی، استفاده از واکسن درمانی با کمک خود باکتری و یا اجزای آن است. هدف از این مطالعه تولید نانوذرات حامل پروتئین نوترکیب <span dir="LTR">CAMP-Sialidase</span> به عنوان یک آنتی&shy;ژن کایمریک جدید برای استفاده در واکسن درمانی بیماری اکنه می&shy;باشد.<br> <strong><span style="color:blue;">مواد و روش&shy; ها:</span></strong> جهت بیان پروتئین نوترکیب <span dir="LTR">CAMP-Sialidase</span> از میزبان <em><span dir="LTR">E. coli</span></em><span dir="LTR"> BL21 DE3</span> استفاده شد. تخلیص پروتئین به روش ترکیبی اوره-ایمیدازول و با استفاده از ستون نیکل-نیتریلو استیک اسید انجام شد. پروتئین نوترکیب با روش وسترن بلاتینگ با آنتی&shy;بادی ضد هیستیدین مورد تایید قرار گرفت. سپس نانوذرات بارگذاری شده با پروتئین نوترکیب به روش ژلاسیون یونی کایتوزان با تری&shy;پلی&shy;فسفات تهیه شدند. در نهایت اندازه و پتانسیل زتای نانوذرات با دستگاه <span dir="LTR">DLS</span> تعیین گردید.<br> <strong><span style="color:blue;">یافته ها:</span></strong> پس از بیان و تخلیص، پروتئین نوترکیب <span dir="LTR">CAMP-Sialidase</span> مورد تایید قرار گرفت. اندازه و پتاسیل زتای نانوذرات حاوی پروتئین نوترکیب <span dir="LTR">CAMP-Sialidase</span> با غلظت 0/6 میلی&shy;گرم بر میلی&shy;لیتر از طریق دستگاه <span dir="LTR">DLS</span> بترتیب 80 نانومتر و 27+ میلی ولت تعیین گردید. میزان بارگذاری پروتئین در نانوذرات 88 درصد تعیین شد.<br> <strong><span dir="RTL"><span style="color:blue;">نتیجه گیری:</span></span></strong><span dir="RTL"> نتایج نشان می&shy;دهد که پروتئین نوترکیب بصورت کاملا سالم بیان شده و بطور موفقیت&shy;آمیزی در داخل نانوذرات کایتوزان کپسوله شده است.&nbsp;</span></span></span></div> <div style="text-align: justify;"><span style="font-family:times new roman;"><span style="color:#0000FF;"><strong>BACKGROUND AND OBJECTIVE:</strong></span> Acne vulgaris is one of the most common skin diseases that imposes too much mental pressure and high costs on patients. The existing treatments have low efficacy and include antibiotics and anti-inflammatory drugs, which have many complications due to the chronic nature of the disease, especially at young age, including antibiotic resistance and allergic reactions. For this reason, one of the new therapeutic approaches is the use of a vaccine with the help of the bacterium or its components. The aim of this study is to produce nanoparticles carrying the recombinant CAMP &ndash; Sialidase protein as a new chimeric antigen to be used in acne vaccine.<br> <span style="color:#0000FF;"><strong>METHODS:&nbsp;</strong></span>To express the recombinant CAMP &ndash; Sialidase protein, <em>E. coli</em> BL21 DE3 was used as the host. Purification of protein was done through combined urea/imidazole method and using a nickel-nitroacetic acid column. The recombinant protein was confirmed using Western Blotting by Anti &ndash; Histidine Antibody. Then, the loaded nanoparticles were prepared by recombinant protein using ionic gelation technique and tripolyphosphate. Finally, the size and zeta potential of the nanoparticles were determined by the DLS device.<br> <span style="color:#0000FF;"><strong>FINDINGS:</strong></span> The recombinant CAMP &ndash; Sialidase protein was confirmed after expression and purification. The size and zeta potential of nanoparticles containing recombinant CAMP &ndash; Sialidase protein at a concentration of 0.6 mg / ml were determined to be 80 nm and +27 mV, respectively, using the DLS device. The loading rate of the protein in the nanoparticles was found to be 88%.<br> <span style="color:#0000FF;"><strong>CONCLUSION: </strong></span>The results show that the recombinant protein is expressed completely and is successfully encapsulated in the chitosan nanoparticles.</span><br> &nbsp;</div> <span dir="RTL"></span> آکنه ولگاریس, پروتئین CAMP-Sialidase , نانوذره کایتوزان, واکسن درمانی Acne Vulgaris, Camp – Sialidase Protein, Chitosan Nanoparticle, Vaccine 64 69 http://jbums.org/browse.php?a_code=A-10-3435-1&slc_lang=fa&sid=1 P Zargham پروین ضرغام zargham.parvin@gmail.com 100319475328460032937 100319475328460032937 No 1. Department of Molecular and Cellular Sciences, Faculty of Advanced Sciences & Technology, Pharmaceutical Sciences Branch, Islamic Azad University, Tehran, I.R.Iran. 1- گروه آموزشی علوم سلولی مولکولی، دانشکده علوم و فناوری های نوین، واحد علوم دارویی دانشگاه آزاد اسلامی-تهران-ایران M Heshmati معصومه حشمتی Heshmati.cmb@gmail.com 100319475328460032938 100319475328460032938 No 1. Department of Molecular and Cellular Sciences, Faculty of Advanced Sciences & Technology, Pharmaceutical Sciences Branch, Islamic Azad University, Tehran, I.R.Iran. 1- گروه آموزشی علوم سلولی مولکولی، دانشکده علوم و فناوری های نوین، واحد علوم دارویی دانشگاه آزاد اسلامی-تهران-ایران K Mansouri کوثر منصوری kowsarmansouri@yahoo.com 100319475328460032939 100319475328460032939 No 2. Chemical Injuries Research Center, Systems Biology and Poisonings Institute, Baqiyatallah University of Medical Sciences, Tehran, I.R.Iran. 2- مرکز تحقیقات آسیب های شیمیایی، انستیتو سیستم بیولوژی و مسمومیت های غذایی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله (عج)، تهران، ایران J Amani جعفر امانی jafar.amani@gmail.com 100319475328460032940 100319475328460032940 No 3. Applied Microbiology Research Center, Institute of Biology and Food Poisoning, Baqiyatallah University of Medical Sciences, Tehran, I.R.Iran. 3- مرکز تحقیقات میکروبیولوژی کاربردی، انستیتو سیستم بیولوژی و مسمومیت های غذایی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله (عج)، تهران، ایران J Salimian جعفر سلیمیان jafar.salimian@gmail.com 100319475328460032941 100319475328460032941 No 2. Chemical Injuries Research Center, Systems Biology and Poisonings Institute, Baqiyatallah University of Medical Sciences, Tehran, I.R.Iran. 2- مرکز تحقیقات آسیب های شیمیایی، انستیتو سیستم بیولوژی و مسمومیت های غذایی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله (عج)، تهران، ایران A Ahmadi علی احمدی ahmadi1919@gmail.com 100319475328460032942 100319475328460032942 Yes 4. Molecular Biology Research Center, Institute of Biology and Food Poisoning, Baqiyatallah University of Medical Sciences, Tehran, I.R.Iran. 4- مرکز تحقیقات بیولوژی مولکولی، انستیتو سیستم بیولوژی و مسمومیت های غذایی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله (عج)، تهران، ایران