fa رشد و تمایز کندروژنیک سلول های بنیادی مزانشیمی بافت چربی انسانی بر روی داربست کیتوسان علوم تشریح Descriptive Sciences تجربی Experimental <p dir="RTL" style="text-align: justify;"><span style="font-family:times new roman;"><span style="color:#0000FF;"><strong>سابقه و هدف:</strong> </span>درمان آسیب های غضروفی به هر علتی تنها با کاهش موقت درد مفاصل همراه است. با فراهم آمدن امکان تمایز سلولهای بنیادی از منابع مختلف به بافت های بالغ، می توان به ترمیم و درمان اسیب های وارده به بافت&shy;های غضروفی سیستم اسکلتی امیدوار بود. در این مطالعه، پتانسیل کندروژنیک اسکافولد <span dir="LTR">CH-&beta;-GP-HEC</span> با سلول های بنیادی مشتق از بافت چربی ارزیابی شد.</span></p> <p dir="RTL" style="text-align: justify;"><span style="font-family:times new roman;"><span style="color:#0000FF;"><strong>مواد و روش&shy;ها: </strong></span>در این مطالعه مقطعی سلولهای بنیادی از بافت چربی زیر جلدی ناحیه شکم 15بیماری که تحت عمل جراحی درمان فتق اینگوینال قرار گرفتند جدا شد. تعداد 10⁵&times; 7-6 سلول برای مدت 21 روز بصورت تک بعدی بر کف پلیت و بصورت سه بعدی بر روی داربست کیتوسان کشت داده شدند. تست <span dir="LTR">MTT</span> برای ارزیابی سمیت داربست بر میزان زنده ماندن سلول انجام شد. تکثیر و تمایز سلول ها پس از رنگ&shy;آمیزی تولوئیدن بلو در دو نوع کشت بررسی گردید. جهت تایید تشکیل غضروف، بیان کلاژن نوع 2 بوسیله ایمنوهیستوشیمی ارزیابی شد.</span></p> <p dir="RTL" style="text-align: justify;"><span style="font-family:times new roman;"><span style="color:#0000FF;"><strong>یافته ها: </strong></span>در تست <span dir="LTR">MTT</span> متوسط <span dir="LTR">OD</span> بزرگتر از 0/8 برای سلول های کشت داده شده بر روی داربست در مقایسه با کنترل تایید کننده عدم سمیت داربست برای کشت سلول های بنیادی می باشد (0/05<span dir="LTR">p></span>)<span dir="LTR">.</span> تمایز کندروژنیک سلول ها بر روی داربست میزان بیشتری از رسوب گلیکوزآمینوگلیکان را در ماتریکس خارج سلولی در مقایسه با کشت تک&shy;لایه نشان داد.همچنین در گروه کشت سه بعدی، سلول&shy;ها کروی و با هسته بازوفیل تر مورفولوژی متفاوتری نسبت به کشت تک لایه داشتند. در یافته&shy;های ایمنوهیستوشیمی افزایش سنتز کلاژن نوع 2 به عنوان مارکر کندروژنز در کشت سه بعدی در مقایسه با کشت تک&shy;لایه دیده شد.</span></p> <p dir="RTL" style="text-align: justify;"><span style="font-family:times new roman;"><span style="color:#0000FF;"><strong>نتیجه&shy; گیری:</strong></span> نتایج مطالعه نشان داد که داربست هیدروژلی <span dir="LTR">CH-&beta;-GP-HEC</span> با ساختار متخلخل محیط مناسبتری را برای رشد سلولهای بنیادی مزانشیمی و تمایز آنها به بافت غضروفی فراهم می کند.</span></p> <p style="text-align: justify;"><span style="font-family:times new roman;"><span style="color:#0000FF;"><strong>BACKGROUND AND OBJECTIVE:</strong> </span>Treatment of cartilage damage for any reason is associated with temporary relief of joint pain. Providing the possibility of differentiating various stem cells into adult tissues can contribute to recovery and treatment of damaged cartilage tissue in skeletal system. In this study, chondrogenic potential of chitosan scaffold, CH-&beta;-GP-HEC, with stem cells derived from human adipose tissue.</span></p> <p style="text-align: justify;"><span style="font-family:times new roman;"><span style="color:#0000FF;"><strong>METHODS:</strong> </span>In this cross-sectional study, adipose tissue-derived stem cells were separated from abdomen of 15 patients who underwent inguinal hernia repair. 6-7&times;10⁵ cells were cultured in plate one-dimensionally and on chitosan scaffold three-dimensionally for 21 days. MTT assay was run to evaluate the toxic effect of scaffold on cell viability. Proliferation and differentiation of cells were studied in the two types of culture after toluidine blue staining. To confirm the formation of cartilage, expression of collagen type II was assessed by immunohistochemistry.</span></p> <p style="text-align: justify;"><span style="font-family:times new roman;"><span style="color:#0000FF;"><strong>FINDING:</strong></span> In MTT assay, the average OD for cells cultured on scaffold is higher than 0.8 compared with control group, which confirms the nontoxicity of scaffold for culturing stem cells (p>0.05). Chondrogenic differentiation of cells on scaffold shows more glycosaminoglycan deposition in the extracellular matrix compared with one-layer culture. Moreover, in group with three-dimensional culture system, cells were spherical and the morphology of nucleus was different from one-layer culture. Regarding immunohistochemistry results, increased synthesis was observed in collagen type II as chondrogenesis markers in three-dimensional culture system compared with one-layer culture.</span></p> <p style="text-align: justify;"><span style="font-family:times new roman;"><span style="color:#0000FF;"><strong>CONCLUSION:</strong></span> Results of the study revealed that hydrogel scaffold, CH-&beta;-GP-HEC, with porous structure provides a better environment for the growth of mesenchymal stem cells and their differentiation into cartilage tissue.</span></p> کندروژنز, بافت چربی, سلول بنیادی مزانشیمی, کیتوسان, داربست Chondrogenesis, Adipose Tissue, Mesenchymal stem cells, Chitosan, Scaffold 32 38 http://jbums.org/browse.php?a_code=A-10-2537-1&slc_lang=fa&sid=1 AA Karimpour عباسعلی کریم پور 100319475328460025840 100319475328460025840 No Cellular and Molecular Biology Research Center, Faculty of Medicine, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, I.R.Iran مرکز تحقیقات بیولوژی سلولی و مولکولی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی مازندران F Talebpour Amiri فرشته طالب پور امیری ftaleb2001@yahoo.co.uk 100319475328460025841 100319475328460025841 Yes Cellular and Molecular Biology Research Center, Faculty of Medicine, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, I.R.Iran مرکز تحقیقات بیولوژی سلولی و مولکولی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی مازندران E Ghaffari المیرا غفاری 100319475328460025842 100319475328460025842 No Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, I.R.Iran دانشگاه علوم پزشکی مازندران A Alizadeh اکرم علیزاده 100319475328460025843 100319475328460025843 No Cellular and Molecular Research Center, Shahrekord University of Medical Sciences, Shahrekord, I.R.Iran مرکز تحقیقات سلولی و مولکولی، دانشگاه علوم پزشکی شهرکرد Z Jamalpour زهرا جمال پور 100319475328460025844 100319475328460025844 No Aja University of Medical Sciences, Tehran, I.R.Iran دانشگاه علوم پزشکی آجا، تهران M Mirhosseini مهری میرحسینی 100319475328460025845 100319475328460025845 No Faculty of Nursing and Midwifery, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, I.R.Iran دانشکده پرستاری و مامایی آمل، دانشگاه علوم پزشکی مازندران A Esmaielnejad Moghadam امیر اسماعیل نژاد مقدم 100319475328460025846 100319475328460025846 No Cellular and Molecular Biology Research Center, Faculty of Medicine, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, I.R.Iran مرکز تحقیقات بیولوژی سلولی و مولکولی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی مازندران A Barzegarnejad ایوب برزگرنژاد 100319475328460025847 100319475328460025847 No Department of Urology, Faculty of Medicine, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, I.R.Iran گروه ارولوژی، دانشگاه علوم پزشکی مازندران