fa ارتباط ژن OCT4B1و آپوپتوزیس در رده های سلول سرطانی ژنتیک، بیولوژی سلولی و مولکولی Genetics, Cell and Molecular Biology كاربردي Applicable <p class="MsoNormal" dir="rtl" style="line-height: 16pt"><b><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra' color: blue">سابقه و هدف:</span></b><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra'"> </span><span dir="ltr">OCT4B1</span><span dir="rtl"></span><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra'"><span dir="rtl"></span> یکی از واریانت های ژن </span><span dir="ltr">OCT4</span><span dir="rtl"></span><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra'"><span dir="rtl"></span> است که به میزان بالایی در رده های سلول سرطانی و نیز بافت های سرطانی بیان می شود. مطالعات اخیر نشان داده اند که این واریانت قدرت آنتی آپوپتوتیکی دارد. هدف از این مطالعه بررسی تاثیر مهار این واریانت بر الگوی بیانی ژنهای خانواده آنتی آپوپتوزیس در سه رده سلول سرطانی انسان می باشد.<o:p /></span></p> <p class="MsoNormal" dir="rtl" style="line-height: 16pt"><b><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra' color: blue">مواد و روشها</span></b><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra'">: در این مطالعه آزمایشگاهی سه رده سلول سرطانی، </span><span dir="ltr">AGS</span><span dir="rtl"></span><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra'"><span dir="rtl"></span>، 5637 و </span><span dir="ltr">U87MG</span><span dir="rtl"></span><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra'"><span dir="rtl"></span> از بانک سلولی انستیتو پاستور ایران خریداری و پس از کشت در دو گروه تست و کنترل با استفاده از تکنولوژی </span><span dir="ltr">siRNA</span><span dir="rtl"></span><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra'"><span dir="rtl"></span> و روش لیپوفکشن به منظور مهار واریانت </span><span dir="ltr">OCT4B1</span><span dir="rtl"></span><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra'"><span dir="rtl"></span>، مورد ترانسفکشن قرار گرفتند. پس از تایید مهار ژنی، تخلیص </span><span dir="ltr">RNA</span><span dir="rtl"></span><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra'"><span dir="rtl"></span> و سنتز </span><span dir="ltr">cDNA</span><span dir="rtl"></span><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra'"><span dir="rtl"></span> انجام شد و نهایتا بیان ژنهای مورد نظر با استفاده از پرایمرهای اختصاصی و روش </span><span dir="ltr">Real-Time PCR</span><span dir="rtl"></span><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra'"><span dir="rtl"></span>، تعیین و میزان بیان هر ژن (با مقایسه گروههای تست و کنترل) تعیین گردید.<o:p /></span></p> <p class="MsoNormal" dir="rtl" style="line-height: 16pt"><b><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra' color: blue">یافته‌ها:</span></b><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra'"> نتایج نشان داد الگوی تغییرات بیان ژنی در سه رده سلول سرطانی مورد مطالعه تقریبا مشابه است و ژنهای </span><span dir="ltr">BCL2</span><span dir="rtl"></span><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra'"><span dir="rtl"></span>، </span><span dir="ltr">BRAF</span><span dir="rtl"></span><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra'"><span dir="rtl"></span> و</span><span dir="ltr">BFAR </span><span dir="rtl"></span><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra'"><span dir="rtl"></span> به ترتیب با 87/20، 33/18 و 11/15 برابر بیشترین کاهش بیان را داشته اند. در کل بیان 20 ژن از 26 ژن مورد بررسی کاهش و چهار ژن </span><span dir="ltr">CASP2</span><span dir="rtl"></span><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra'"><span dir="rtl"></span>، </span><span dir="ltr">IGF1R</span><span dir="rtl"></span><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra'"><span dir="rtl"></span> ،</span><span dir="ltr">TNF</span><span dir="rtl"></span><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra'"><span dir="rtl"></span> و </span><span dir="ltr">MCL1</span><span dir="rtl"></span><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra'"><span dir="rtl"></span>  افزایش بیان جزیی یا بیان بدون تغییر داشته اند. بیان ژن </span><span dir="ltr">CFLAR</span><span dir="rtl"></span><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra'"><span dir="rtl"></span> در رده سلول سرطانی </span><span dir="ltr">U87MG</span><span dir="rtl"></span><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra'"><span dir="rtl"></span>، افزایش بیان اما در دو رده سلول سرطانی دیگر کاهش بیان جزیی را نشان داد.<o:p /></span></p> <b><span lang="FA" dir="rtl" style="font-size: 10pt font-family: '2 Mitra' color: blue">نتیجه گیری:</span></b><span lang="FA" dir="rtl" style="font-size: 10pt font-family: '2 Mitra'"> طبق نتایج بدست آمده احتمالا مهار </span><span style="font-size: 10pt font-family: 'Times New Roman', serif">OCT4B1</span><span dir="rtl"></span><span lang="FA" dir="rtl" style="font-size: 10pt font-family: '2 Mitra'"><span dir="rtl"></span> با ممانعت از بیان ژنهای خانواده آنتی آپوپتوزیس موجب کمک به القاء مرگ برنامه ریزی شده در رده های سلول سرطانی می شود. </span> <p class="MsoNormal" style="text-align: left line-height: 16pt direction: ltr unicode-bidi: embed"><b><span style="color: blue">ABSTRACT<o:p /></span></b></p> <p class="MsoNormal" style="line-height: 16pt direction: ltr unicode-bidi: embed"><b><span style="color: blue">BACKGROUND AND OBJECTIVE:</span></b> OCT4B1, as one of the variants of OCT4 gene, is expressed at higher levels in cancer tissues and cancer cell lines, compared to other OCT4 variants. Recent studies have revealed the anti-apoptotic role of OCT4B1. The aim of this study was to evaluate the effect of OCT4B1 suppression on the expression profile of anti-apoptotic genes in three human tumor cell lines.<o:p /></p> <p class="MsoNormal" style="line-height: 16pt direction: ltr unicode-bidi: embed"><b><span style="color: blue">METHODS:</span></b> In this in-vitro study, three human tumor cell lines including AGS (stomach adenocarcinoma), 5637 (bladder cancer), and U87MG (brain tumor) were purchased from the National Cell Bank of Iran (Pasteur Institute) and cultured in test and control groups. In order to suppress OCT4B1 expression, the cultures were transfected, using siRNA technology and lipofection method. After confirming the suppression process, total RNA was extracted and cDNA was synthesized. Finally, the expression rates of anti-apoptotic genes were determined, using specific primers and real-time PCR technique. <o:p /></p> <p class="MsoNormal" style="line-height: 16pt direction: ltr unicode-bidi: embed"><b><span style="color: blue">FINDINGS:</span></b> Our data revealed an almost similar pattern of alteration in the expression profile of anti-apoptotic genes in all three cell lines. Also, BCL2, BRAF, and BFAR genes exhibited the most significant down-regulation by 20.87, 18.33, and 15.11 folds, respectively. The expression of at least 20 genes (out of 26 genes) decreased, while the expression rates of CASP2, IGF1R, TNF, and MCL1 were up-regulated or remained unchanged. Also, the expression of CFLAR gene was up-regulated in U87MG and down-regulated in other cell lines (5637 and AGS).<o:p /></p> <p class="MsoNormal" style="line-height: 16pt direction: ltr unicode-bidi: embed"><b><span style="color: blue">CONCLUSION:</span></b> Based on our findings, OCT4B1 suppression by blocking the expression of anti-apoptotic genes may result in the induction of apoptosis in cancer cell lines.<o:p /></p> واژه های کلیدی: ژن OCT4B1, خانواده ژنی آنتی آپوپتوزیس, رده های سلول سرطانی. KEY WORDS: Anti-apoptotic Gene Family, Cancer Cell Lines, OCT4B1. 37 44 http://jbums.org/browse.php?a_code=A-10-1552-1&slc_lang=fa&sid=1 Mohammadreza Mirzaie محمدرضا میرزایی mirzaeemr@gmail.com 100319475328460010726 100319475328460010726 Yes Department of Biochemistry, Biophysics and Genetics, Faculty of Medicine, Rafsanjan University of Medical Sciences گروه بیوشیمی،بیوفیزیک و ژنتیک،دانشکده پزشکی،دانشگاه علوم پزشکی رفسنجان Gholamhossein Hassanshahi غلامحسین حسن شاهی kazemi24@yahoo.com 100319475328460010727 100319475328460010727 No Mohammadreza Hajizadeh محمد رضا حاجی زاده hajizadehus@yahoo.com 100319475328460010728 100319475328460010728 No Mehdi Mahmoodi مهدی محمودی mahmoodies@yahoo.com 100319475328460010729 100319475328460010729 No Mahmood Nazari محمود نظری mirzaeemr@gmail.com 100319475328460010730 100319475328460010730 No Mahdi Chahardoli مهدی چهاردولی chahardoli.mahdi@yahoo.com 100319475328460010731 100319475328460010731 No