fa جداسازی و تمایز سلول‌های بنیادی پالپ دندان به سمت ادونتوبلاست دندانپزشکی(اندو) Dentistry (Endo) تجربی Experimental <div style="text-align: right"><p class="MsoNormalCxSpFirst" dir="rtl"><b><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra' color: blue">سابقه و هدف:</span></b><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra'"> با توجه به منابع محدود سلول های بنیادی یافتن راهکارهای مناسب برای جداسازی و تکثیر و تمایز این سلول ها حائز اهمیت می باشد. یکی از منابع سهل الوصول سلول های بنیادی بالغ، پالپ دندان مولر سوم انسان می</span><span lang="FA">­</span><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra'">باشد که معمولا بدون استفاده می ماند. این سلول ها قابلیت تمایز به انواع سلول ها را دارند. هدف از این پژوهش جداسازی سلول های بنیادی از پالپ دندان مولر سوم انسان با روشی نوین، کشت این سلول ها و سپس القاء تمایز سلول های کشت داده شده به سمت ادونتوبلاست بود.<o:p /></span></p><p class="MsoNormalCxSpMiddle" dir="rtl"><b><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra' color: blue">مواد و روشها:</span></b><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra' color: blue"> </span><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra'">در این مطالعه تجربی تعداد 20 عدد دندان نهفته عقل جهت استخراج سلول­های بنیادی مورد استفاده قرار گرفت. از روش کشت قطعات بافت پالپ هضم شده برای جدا سازی سلول های بنیادی استفاده شد. بیان برخی ژن های مارکر سلول بنیادی با روش </span><span dir="ltr">RT-PCR</span><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra'"><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span> در این سلول ها بررسی شد. سپس این سلول­ها با استفاده از دگزامتازون و پروتئین شکل زای استخوان (</span><span dir="ltr">BMP-2</span><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra'"><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span>) تحت القاء برای تمایز ادونتوبلاستی قرار گرفتند و بیان ژن­های مارکر ادونتوبلاست در سلول­های تحت القاء با روش­های </span><span dir="ltr">RT-PCR</span><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra'"><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span> و ایمیونوسیتوشیمی بررسی شد.<o:p /></span></p><p class="MsoNormal" dir="rtl"><b><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra' color: blue">یافته‌ها:</span></b><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra'"> سلول­های بنیادی با بازدهی بالا از پالپ دندان جداسازی شدند و بررسی </span><span dir="ltr">RT-PCR</span><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra'"><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span> نشان داد این سلول­ها برخی مارکرهای سلول بنیادی رویانی را بیان می­کنند. سلول­های تحت القاء، مارکرهای ادونتوبلاستی مثل </span><span dir="ltr">DSPP</span><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra'"><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span>، </span><span dir="ltr">DMP-1</span><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra'"><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span>، </span><span dir="ltr">BMP₇</span><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra'"><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span> و </span><span dir="ltr">Osteopontin</span><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra'"><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span> را بیان نکردند. همچنین پروتئین های </span><span dir="ltr">DSPP</span><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra'"><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span> و </span><span dir="ltr">DMP-1</span><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span><span lang="FA" style="font-family: '2 Mitra'"><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span> در سلول­های تحت القاء تولید نشدند.<o:p /></span></p><p class="MsoNormalCxSpFirst" dir="rtl"> <b><span lang="FA" dir="rtl" style="font-size: 10pt font-family: '2 Mitra' color: blue">نتیجه گیری:</span></b><span lang="FA" dir="rtl" style="font-size: 10pt font-family: '2 Mitra'"> علی رغم جداسازی موفقیت آمیز سلول های بنیادی، با روش به­کار رفته، سلول­های القاء شده به سمت ادونتوبلاست تمایز نیافتند که این امر می تواند به خاطر روش تمایز، پاساژ دادن حین القاء و یا کشت تک لایه باشد.</span></p></div> <p class="MsoNormal" style="direction: ltr unicode-bidi: embed"><b><span style="color: blue">BACKGROUND AND OBJECTIVE:</span></b> Limited resources for adult stem cells necessitate appropriate methods for isolation, proliferation and differentiation of these cells. Human third molar is an easily available source in this regard that usually remains unused<span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span><span lang="FA" dir="rtl"><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span>.</span><span dir="ltr"></span><span dir="ltr"></span><span dir="ltr"></span><span dir="ltr"></span> The aim of this study was to investigate the isolation, culture and odontogenic differentiation of human dental pulp stem cells.<span style="font-size: 12pt"><o:p /></span></p><p class="MsoNormal" style="direction: ltr unicode-bidi: embed"><b><span style="color: blue">METHODS:</span></b> In this experimental study, twenty human third molars were used for stem cell isolation. The digested pulp tissue culture approach was used to isolate stem cells. Some markers of stem cells were studied by RT-PCR. Stem cells were then induced towards odontoblast cells by use of BMP-2 and Dexamethasone. Expression of odontoblastic markers was investigated in induced cells by RT-PCR and immunocytochemistry methods.<o:p /></p><p class="MsoNormal" style="direction: ltr unicode-bidi: embed"><b><span style="color: blue">FINDINGS:</span></b> The human dental pulp stem cells were isolated with high efficiency.  RT-PCR analysis showed that these cells express some markers of embryonic stem cells. However, the induced cells did not expressed odontoblastic markers such as DSPP, DMP-1, BMP7<span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span> </span>and<span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span> </span>Osteopontin. Also the induced cells did not produce DSPP and DMP-1 proteins.<b><span lang="FA" dir="rtl" style="font-size: 12pt"><o:p /></span></b></p><p class="MsoNormal" style="direction: ltr unicode-bidi: embed"><b><span style="color: blue">CONCLUSION:</span></b> Despite the successful isolation of stem cells, the induced cells failed to differentiate into odontoblasts. This may be due to the differentiation method as well as the passage during induction or monolayer culture<span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span><span lang="FA" dir="rtl"><span dir="rtl"></span><span dir="rtl"></span>.</span><span dir="ltr"></span><span dir="ltr"></span><span lang="FA"><span dir="ltr"></span><span dir="ltr"></span> </span><o:p /></p><p class="MsoNormal" style="unicode-bidi: embed"><br></p> واژه های کلیدی: سلول های بنیادی پالپ دندان, ادونتوبلاست, پروتئین شکل زای استخوان (BMP-2), دگزامتازون. KEY WORDS: Dental Pulp Stem Cells,Odontoblasts, BMP-2,Dexamethasone. 23 31 http://jbums.org/browse.php?a_code=A-10-1472-1&slc_lang=fa&sid=1 Maryam Raoof مریم رئوف maryam.raoof@gmail.com 10031947532846007630 10031947532846007630 Yes Department of Endodontics, School of Dentistry, Kerman University of Medical Sciences, Kerman, Iran. گروه اندودنتیکس، دانشکده دندانپزشکی ، دانشگاه علوم پژشکی کرمان، کرمان، ایران ali Mohammadi Kamal-abadi علی محمدی کمال آبادی ali.muhammadi@gmail.com 10031947532846007631 10031947532846007631 No Department of Biotechnology, Institute of Science and High Technology and Environmental Sciences, Graduate University of Advanced Technology, Kerman,Iran. گروه بیوتکنولوژی ، پژوهشگاه علوم و تکنولوژی پیشرفته و علوم محیطی ، دانشگاه تحصیلات تکمیلی تکنولوژی پیشرفته، کرمان، ایران Mohammad Mehdi Yaghoobi محمد مهدی یعقوبی mehdi.yaghoobi@gmail.com 10031947532846007632 10031947532846007632 No Department of Biotechnology, Institute of Science and High Technology and Environmental Sciences, Graduate University of Advanced Technology, Kerman,Iran. گروه بیوتکنولوژی ، پژوهشگاه علوم و تکنولوژی پیشرفته و علوم محیطی ، دانشگاه تحصیلات تکمیلی تکنولوژی پیشرفته، کرمان، ایران razieh kooshki راضیه کوشکی kooshki.razieh@gmail.com 10031947532846007633 10031947532846007633 No Department of Biology, Faculty of Sciences, Shahid Bahonar University of Kerman, Kerman, Iran. گروه زیست شناسی ،دانشکده علوم پایه ، دانشگاه شهید باهنر کرمان، کرمان، ایران Mehdi Abbasnejad مهدی عباس نژاد mabbas@mail.uk.ac.ir 10031947532846007634 10031947532846007634 No Department of Biology, Faculty of Sciences, Shahid Bahonar University of Kerman, Kerman, Iran. گروه زیست شناسی ،دانشکده علوم پایه ، دانشگاه شهید باهنر کرمان، کرمان، ایران ali Derakhshani علی درخشانی derakhshan_a64@yahoo.com 10031947532846007635 10031947532846007635 No Department of Pathology, Stem Cell Research Center, Kerman University of Medical Sciences, Kerman, Iran. گروه پاتولوژی، مرکز تحقیقات سلو‌ل‌های بنیادی، دانشگاه علوم پزشکی کرمان، کرمان، ایران