fa تهیه و تخلیص آنتی بادی آنتی ایمونوگلوبولین Y از خرگوش بیوشیمی Biochemical تحلیلی Research سابقه و هدف: آنتی بادی های زرده تخم مرغ (IgY) نقش فزاینده ای به عنوان جایگزینی آنتی بادی های پلی کونال پستانداران ایفا می کنند. این آنتی بادی ها در پیشگیری، تشخیص و درمان بیماری ها مورد استفاده قرار می گیرند. آنتی بادی های آنتی IgY در سنجش های ایمنی و درمان کاربرد دارند. هدف از این تحقیق تهیه و تخلیص آنتی ایمونوگلوبولین Y از سرم خرگوش و تایید فعالیت آن بود. مواد و روش ها: در این مطالعه IgY و سایر پروتئین های محلول در آب تخم مرغ با استفاده از با اسید و کلروفرم استخراج شدند و سپس کروماتوگرافی تیوفیلیک (T-gel) برای خالص سازی IgY استفاده گردید، سپس دو سر خرگوش ماده با ایمونوگلوبولین Y تخلیص شد، به همراه ادجوانت فروند ایمونیزه شدند، تزریق های بوستر و خونگیری در زمان های معین انجام شد. رسوب دهی توسط آمونیوم سولفات و بعد کروماتوگرافی ژل فیلتراسیون یا کروماتوگرافی T-gel جهت خالص سازی آنتی IgY انجام گردید. از الکتروفورز استات سلولز و ایمونودیفوزیون دو طرفه و ELISA برای تایید ماهیت و فعالیت آنتی بادی علیه IgY استفاده شد. یافته ها: الکتروفورز محصول خالص شده (IgY) در ناحیه گاما گلوبولین مشاهده شد. آنتی بادی های خالص شده از سرم خرگوش در ناحیه گاماگلوبولین ظاهر شدند که در ایمونودیفوزیون دو طرفه علیه IgY واکنش داده و تیتر آنتی بادی در ELISA یک ده هزارم بدست آمد. نتیجه گیری: این آنتی بادی ها می توانند در سنجش های ایمنی برای شناسایی و سنجش انواع مولکول ها به عنوان معرف انتی ایمونوگلوبولین ‎Y کاربرد داشته باشند. Background and Objective: Chicken egg yolk antibodies (IgY) play an important role as an alternative to mammalian polyclonal antibodies. They are recently used in medical research for prophylaxis, diagnosis and treatment of diseases. Anti-IgY antibodies are used for immunoassay and therapy. The aim of this study was preparation and purification of anti-immunoglobulin Y antibodies from rabbit serum and confirm of its activity. Methods: IgY and other water-soluble proteins were extracted with acid and chloroform and then thiophilic chromatography (T-gel) was performed and applied for purification of IgY. Two female rabbits were immunized with IgY in Freud’s adjuvant and then booster doses were administered, blood samples were collected by times. Ammonium sulfate precipitation, then gel filtration or T-gel chromatography used for purification of Anti-IgY antibodies. Cellulous acetate electrophoresis, double immunodiffusion and ELISA procedures used for confirm of identification and activity. Findings: The purified protein (IgY) was observed in the γ-globulin region of electrophoresis. The purified antibodies from rabbit serum were observed in the γ-globulin region, which reacted against IgY in double immunodiffusion and the titer of purified antibody-using ELISA, 1.10000 obtained. Conclusion: These antibodies serve as the basis of many immunoassays for detection and assay of several molecules as anti-immunoglobulin Y reagents. ایمونوگلوبولین Y, آنتی بادی آنتی IgY, خرگوش, خالص سازی Immunoglobulin Y, Anti-IgY antibody, Rabbit, Purification 7 13 http://jbums.org/browse.php?a_code=A-10-1370-229&slc_lang=fa&sid=1 M Pour Amir مهدی پورامیر، ، 10031947532846002227 10031947532846002227 Yes S Mahjoub سلیمان محجوب 10031947532846002228 10031947532846002228 No GH Maliji قربان ملیجی 10031947532846002229 10031947532846002229 No