[صفحه اصلی ]   [Archive] [ English ]  
:: صفحه اصلي :: درباره نشريه :: آخرين شماره :: تمام شماره‌ها :: جستجو :: ثبت نام :: ارسال مقاله :: تماس با ما ::
:: دوره 19، شماره 8 - ( 5-1396 ) ::
جلد 19 شماره 8 صفحات 58-64 برگشت به فهرست نسخه ها
تولید انگلهای نوترکیب لیشمانیا تروپیکا بیان کننده دو پروتئین گزارشگرEGFP و لوسیفراز
طاهره طاهری *، مهدیه اسکندر، سیما رأفتی
دکترا انستیتو پاستور ایران‌ ، tahereh_t@yahoo.com
چکیده:   (1485 مشاهده)

سابقه و هدف: انگل لیشمانیا تروپیکا عامل بروز لیشمانیوز پوستی و احشایی در ایران است. بعلت فقدان یک آزمون دقیق، حساس و غیرتهاجمی در مدل حیوانی، درمان و واکسیناسیون برعلیه آن با چالش بزرگی همراه است. لذا در این مطالعه، لیشمانیا تروپیکا با دو ژن گزارشگر پروتئین فلورسنت سبز (egfp) و لوسیفراز (luc) به شکل اتصال یافته (egfp-luc) ترانسفکت شد تا در مطالعات آتی بعنوان یک ابزار تشخیصی سریع و دقیق برای ردیابی و اندازه گیری میزان عفونت در بدن حیوان زنده مورد استفاده قرار گیرد.

مواد و روش­ها: در این مطالعه آزمایشی-تجربی، سازه ژنی حاوی ژنهای egfp-luc از طریق نوترکیبی مشابه در ژنوم سویه ایرانی انگل لیشمانیا تروپیکا (در لوکوس 18srRNA) درج شد. برای غربالگری انگلهای ترانسفکت شده، از شاخص انتخابی G418 استفاده گردید. سپس بوسیله PCR با پرایمرهای مختلف ژنوتیپ انگلها بررسی شد. همچنین با استفاده از وسترن بلات، میکروسکوپ فلورسنت و فلوسایتومتری بیان پروتئینهای گزارشگر ارزیابی شد.

یافته ­ها: مشاهدات اولیه فنوتیپی انگل با استفاده از میکروسکوپ فلورسنت نشان داد که انگلهای نوترکیب L. tropicaEGFP-LUC پروتئین EGFP را در سیتوپلاسم تولید کرده اند. میزان کمی شدت فلورسنت اندازه گیری شده در انگلهای نوترکیب با استفاده از فلوسایتومتری بیش از 90% بود. نتایج آزمونهای PCR ورود ژنها را بدرون ژنوم و لوکوس مربوطه و وسترن بلات بیان هر دو ژن را در شکل پروماستیگوت انگل نشان دادند.

نتیجه­ گیری: این اولین گزارش مبنی بر تولید انگلهای نوترکیب لیشمانیا تروپیکا بیان کننده هر دو ژن گزارشگرegfp  و luc بطور همزمان است.

واژه‌های کلیدی: لیشمانیا تروپیکا، لیشمانیوز پوستی، ترانسفکشن، ژنهای گزارشگر، پروتئین فلورسنت سبز، لوسیفراز، فلوسایتومتری، میکروسکوپ فلورسنت
متن کامل [PDF 377 kb]   (169 دریافت)    
نوع مطالعه: تحقیقی | موضوع مقاله: انگل شناسی
دریافت: ۱۳۹۵/۱۲/۲۱ | پذیرش: ۱۳۹۶/۳/۲ | انتشار: ۱۳۹۶/۳/۲۰
* نشانی نویسنده مسئول: ‌: خیابان انقلاب، خیابان 12 فروردین، پلاک 69، انستیتو پاستور ایران‌ 69
ارسال پیام به نویسنده مسئول



DOI: 10.22088/jbums.19.8.58


XML   English Abstract   Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Taheri T, Eskandar M, Rafati S. Production of Recombinant Leishmania Tropica Parasites Expressing Two Proteins of Egfp and Luciferase Reporter. JBUMS. 2017; 19 (8) :58-64
URL: http://jbums.org/article-1-6682-fa.html
طاهری طاهره، اسکندر مهدیه، رأفتی سیما. تولید انگلهای نوترکیب لیشمانیا تروپیکا بیان کننده دو پروتئین گزارشگرEGFP و لوسیفراز. مجله علمی دانشگاه علوم پزشکی بابل. 1396; 19 (8) :58-64

URL: http://jbums.org/article-1-6682-fa.html

دوره 19، شماره 8 - ( 5-1396 ) برگشت به فهرست نسخه ها
مجله علمی دانشگاه علوم پزشکی بابل Journal of Babol University of Medical Sciences

The Journal of Babol University of Medical Sciences is licensed under a Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License.
Persian site map - English site map - Created in 0.054 seconds with 800 queries by yektaweb 3531