[صفحه اصلی ]   [Archive] [ English ]  
:: صفحه اصلي :: درباره نشريه :: آخرين شماره :: تمام شماره‌ها :: جستجو :: ثبت نام :: ارسال مقاله :: تماس با ما ::
:: دوره 18، شماره 6 - ( 3-1395 ) ::
جلد 18 شماره 6 صفحات 72-66 برگشت به فهرست نسخه ها
همسانه سازی و ساخت وکتور بیانی ژن گلوتامات دکربوکسیلاز باکتری لاکتوباسیلوس پلانتاروم
بنت الهدی عربپور، ابوالقاسم اسماعیلی*، محمد ربانی
گروه زیست‌شناسی، دانشکده علوم، دانشگاه اصفهان ، aesmaeili@sci.ui.ac.ir
چکیده:   (4933 مشاهده)

سابقه و هدف: گاما آمینو بوتیریک اسید (گابا) یک اسیدآمینه چهار کربنه غیر پروتئینی است که در درمان فشارخون، دیابت، التهاب و افسردگی می تواند بکار رود. گابا توسط آنزیم گلوتامیک اسید دکربوکسیلاز در بسیاری از موجودات شامل باکتری‌ها سنتز می شود. از اینرو همسانه سازی این آنزیم جهت بهینه‌سازی تولید گابا اهمیت دارد. هدف از این پژوهش همسانه سازی و ساخت وکتور بیانی حاوی ژن گلوتامات ­دکربوکسیلاز از باکتری لاکتوباسیلوس پلانتاروم PTC1058 است.

مواد و روش­ها: در یک مطالعه تجربی خصوصیات مورفولوژیک، بیوشیمیایی، ژنتیکیِ و توالی یابی 16s rDNA سویه لاکتوباسیلوس پلانتاروم1058 بررسی شد. سپس DNA ژنومیک این باکتری جدا و با استفاده از PCR ژن گلوتامات­دکربوکسیلاز تکثر شد. سپس این ژن در حامل کلونینگ pJET1.2/Blunt وارد و در حامل pET32a ساب کلون گردید. حامل پلاسمید بیانی pET32a-gad در اشریشیاکلی سویه BL21 ترانسفورم گردید و بیان پروتئین با استفاده از SDS-PAGE بررسی شد.

یافته ­ها: یافته‌های به دست آمده از بررسی‌های مورفولوژیک، بیوشیمیایی و ژنتیکیِ توالی یابی 16s rDNAنشان داد که زیر سویه‌ی مورد بررسی مربوط به سویه لاکتوباسیلوس پلانتاروم است. نتیجه­ی توالی یابی قطعه­ی تکثیرشده با استفاده از PCR وجود ژن گلوتامات دکربوکسیلاز را نشان داد. در پایان نتیجه کلنیPCR و آنالیز SDS-PAGE، صحت همسانه­سازی و بیان آنزیم در سویه­ی نوترکیب BL21را  تأیید کرد.

نتیجه گیری: این مطالعه همسانه سازی موفق ژن گلوتامات دکربوکسیلاز از لاکتوباسیلوس پلانتاروم1058 را نشان داد. ژن همسانه سازی شده می تواند در سیستم‌های پروکاریوتی و یوکاریوتی سریع رشد و استفاده از محیط کشت‌های ارزان‌تر و حتی پسماند­های غیرقابل بازیافت به کاربرد

واژه‌های کلیدی: همسانه سازی، گاماآمینوبوتیریک اسید، گلوتامات دکربوکسیلاز، لاکتوباسیلوس
متن کامل [PDF 464 kb]   (2116 دریافت)    
نوع مطالعه: تحقیقی | موضوع مقاله: ژنتیک، بیولوژی سلولی و مولکولی
دریافت: 1394/5/28 | پذیرش: 1395/2/29 | انتشار: 1395/3/16
ارسال پیام به نویسنده مسئول



XML   English Abstract   Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Arabpour B, Esmaeili A, Rabbani M. Cloning and Expression Vector Construction of Glutamate Decarboxylase Gene from Lactobacillus Plantarum. JBUMS. 2016; 18 (6) :66-72
URL: http://jbums.org/article-1-5638-fa.html

عربپور بنت الهدی، اسماعیلی ابوالقاسم، ربانی محمد. همسانه سازی و ساخت وکتور بیانی ژن گلوتامات دکربوکسیلاز باکتری لاکتوباسیلوس پلانتاروم . مجله علمی دانشگاه علوم پزشکی بابل. 1395; 18 (6) :72-66

URL: http://jbums.org/article-1-5638-fa.html



بازنشر اطلاعات
Creative Commons License این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است.
دوره 18، شماره 6 - ( 3-1395 ) برگشت به فهرست نسخه ها
مجله علمی دانشگاه علوم پزشکی بابل Journal of Babol University of Medical Sciences

The Journal of Babol University of Medical Sciences is licensed under a Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License.
Persian site map - English site map - Created in 0.04 seconds with 32 queries by YEKTAWEB 4355