[صفحه اصلی ]   [Archive] [ English ]  
:: صفحه اصلي :: درباره نشريه :: آخرين شماره :: تمام شماره‌ها :: جستجو :: ثبت نام :: ارسال مقاله :: تماس با ما ::
:: دوره 17، شماره 2 - ( 11-1393 ) ::
جلد 17 شماره 2 صفحات 7-14 برگشت به فهرست نسخه ها
تولید و تخلیص آنتی‌بادی پلی‌کلونال علیه کلرا توکسین
شهرام نظریان، محمدعلی عارف‌پور ، محمدجواد باقری‌پور، غلامرضا اولاد
چکیده:   (4405 مشاهده)

سابقه و هدف: وبا بیماری خطرناکی است که توسط باکتری ویبریو کلرا ایجاد می‌ شود. توکسین کلرا مهم‌ترین عامل ویرولانس در بیماریزایی ویبریوکلرا می باشد. زیر واحد B انتروتوکسین (CTxB) که مسئول اتصال سم به سلول یوکاریوتی است، ویژگیهای ایمونوژنیک دارد. هدف از این تحقیق تولید و تخلیص آنتی بادی علیه پروتئین نوترکیبCTxB می‌باشد.

مواد و روشها: پروتئین نوترکیب CTxB بیان و با کروماتوگرافی میل ترکیبیNi-NTA  تخلیص گردید. تعداد 10 موش BALB/C با سن پنج هفته به دو گروه کنترل و تست تقسیم شدند. هر موش از گروه تست، 10 میکروگرم از پروتئین نوترکیب را به همراه ادجوان فروند به صورت زیر جلدی دریافت کرد. تیترآنتی بادی در موشهای ایمن شده به روش الایزا بررسی شد. سرم موشهای دریافت کننده PBS به عنوان کنترل در روش الایزا استفاده شد. IgG به وسیله ستون تمایلی پروتئین G خالص گردید. اثر مهاری آنتی بادی ضد CTxB بر روی توکسین با استفاده از روش GM1-ELISA ارزیابی شد.

یافته‌ها: نتایج الایزا واکنش اختصاصی پروتئین نوترکیب با آنتی بادی ضد توکسین کلرا را نشان داد. میزان پروتئین خالص شده برای هر لیتر از محیط 9 میلی گرم بود. نتایج الایزا نشان داد پس از هر بار تزریق میزان تولید آنتی‌بادی در بدن موش‌ها افزایش یافته است. میزان جذب مربوط به سرم با رقت 500/ 1 بالاتر از 3 بود. غلظت آنتی بادی تخلیص شده بر طبق روش برادفورد، mg/ml 1 بود. در واکنش الایزا، 156 نانوگرم از زیر واحد اتصالی سم توسط آنتی بادی شناسایی شد. اتصال توکسین به GM1 کوت شده با استفاده از سرم حیوان ایمن شده تا 70 درصد کاهش یافت.

نتیجه گیری: نتایج این تحقیق کارائی پروتئین CTxB نوترکیب به عنوان ایمونوژن موثر تحریک کننده پاسخ هومورال علیه توکسین کلرا را نشان داد. آنتی بادی ضد زیر واحد B نوترکیب، توانائی شناسایی توکسین و مهار اتصال آن به گیرنده GM1 را دارا است.

 

واژه‌های کلیدی: ویبریوکلرا، زیر واحد B توکسین کلرا، پروتئین نوترکیب، آنتی بادی پلی کلونال، GM1-ELISA
متن کامل [PDF 353 kb]   (1122 دریافت)    
نوع مطالعه: تحقیقی | موضوع مقاله: فیزیولوژی
دریافت: ۱۳۹۳/۱۱/۱۴ | پذیرش: ۱۳۹۳/۱۱/۱۴ | انتشار: ۱۳۹۳/۱۱/۱۴



XML   English Abstract   Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Nazarian S, Arefpour M, Bagheripour M, Olad G. Production and Purification of Polyclonal Antibody against Cholera Toxin. JBUMS. 2015; 17 (2) :7-14
URL: http://jbums.org/article-1-5308-fa.html

نظریان شهرام، عارف‌پور محمدعلی، باقری‌پور محمدجواد، اولاد غلامرضا. تولید و تخلیص آنتی‌بادی پلی‌کلونال علیه کلرا توکسین . مجله علمی دانشگاه علوم پزشکی بابل. 1393; 17 (2) :7-14

URL: http://jbums.org/article-1-5308-fa.html



دوره 17، شماره 2 - ( 11-1393 ) برگشت به فهرست نسخه ها
مجله علمی دانشگاه علوم پزشکی بابل Journal of Babol University of Medical Sciences

The Journal of Babol University of Medical Sciences is licensed under a Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License.
Persian site map - English site map - Created in 0.07 seconds with 33 queries by YEKTAWEB 3698